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用好C18液相色譜柱的關鍵和維護處理工作

更新時間:2021-12-20 點擊次數:940
   用好C18液相色譜柱的關鍵。
  ①經常沖洗色譜柱。每次使用后,必須用強溶劑沖洗30分鐘左右,或者沖洗床體積(柱體積)的20倍左右。
 
  ②作者一般是將長期不用的色譜柱浸泡在甲醇中,效果很好。
 
  ③柱頭必須擰緊,不許有任何緩沖液留在色譜柱內。
 
  ④在改變溶劑的組成時,有機溶劑和水之間的切換應該緩慢進行,如果快速變換,有可能損壞色譜柱。
 
  ⑤對于復雜體系的樣品(如生物樣品、中藥樣品)一定要進行預處理,或者在色譜柱和進樣器之間加入保護柱。
 
  ⑥不能對一般色譜柱進行反沖洗,否則將迅速降低柱效;但是,色譜柱的生產者指明該色譜柱可以反沖洗時例外。
 
  ⑦不能受到強烈的機械振動;不能在壓力和溫度急劇變化的情況下使用,否則色譜柱內的填料會受到影晌。
 
  C18液相色譜柱的維護:
  a.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)。
 
  b.pH穩定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍。
 
  c.避免流動相組成及極性的劇烈變化。
 
  d.流動相使用前必須經脫氣和過濾處理。
 
  e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中。
 
  f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。

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