01、概述

 02、原理

凈化的基礎是抗原抗體反應，伏馬毒素單克隆抗體連接在柱內凝膠介質上，樣品中的伏馬毒素經過提取、過濾、稀釋，然后將樣品提取液緩慢通過伏馬毒素免疫親和柱，在免疫親和柱內，伏馬毒素與抗體結合，洗滌液通過免疫親和柱除去未被結合的雜質。最后采用甲醇-乙酸洗脫伏馬毒素，然后進行相關分析。

03、凈化步驟

1）準確稱取20g（精確至0.01g）粉碎的樣品；

2）先加入50mL樣品提取液混合，搖床振蕩提取30min，于4000r/min，離心5min，取出上清液于試劑瓶中；

3）將底部沉淀部分再加入50mL樣品提取液混合，以搖床振蕩提取30min，于4000r/min，離心5min，取出上清液，與前面的上清液合并混勻；

4）準確移取10mL上清液，加入40mL 1.5%吐溫20-PBS稀釋，用玻璃微纖維濾紙過濾，至濾液澄清，備用。

5）準確移取15mL混勻濾液（相當于0.6g樣品）過親和柱。

6）3mL柱管上方堵頭直接連接20mL針筒固定后使用（柱管內偶見有小氣泡屬正常現象，不影響親和柱的使用）；

7）準確移取上述混勻濾液，注入注射器中，調節針筒壓力使其以2秒/滴的速度緩慢通過免疫親和柱；

8）先用10mL PBS沖洗柱子，再用3mL水沖洗柱子，棄去流出液，流速1秒/滴，直至2~3mL空氣通過柱體，保證柱子內沒有殘余液體；

9）準確加入3.0mL洗脫液洗脫，流速自然重力，直至2~3mL空氣通過柱體，保證柱子內沒有殘余液體。收集全部洗脫液，進行相關測定。

（注意：整個純化過程盡量不要讓柱子干燥！）

04、色譜條件

05、譜圖展示

06、結果展示

【 產品信息 】