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新品上市丨新品配新標(biāo),Welchrom維生素B12免疫親和柱震撼來襲

更新時(shí)間:2022-09-20 點(diǎn)擊次數(shù):1509


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維生素B12,又稱鈷胺素,是人體必須的維生素之一,但人體對(duì)其需求量相對(duì)較少,每天僅需3μg即可滿足,維生素B12是wei一的一種需要腸道分泌物幫助才能被吸收的維生素,可以參與制造骨髓紅細(xì)胞,防止惡行貧血,防止大腦神經(jīng)受到破壞。但過多量的維生素B12可能導(dǎo)致神經(jīng)損害、加重白血病或者引起過敏性疾病等問題。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的維生素B12含量在嬰幼兒配方食品中為8.0μg/kg:兒童用乳粉為10~30μg/kg:孕產(chǎn)婦用乳粉為10~66μg/kg。


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為保障廣大群眾食品安全,月旭科技最新推出Welchrom® 維生素B12親和柱,廣泛地應(yīng)用于飲料、牛奶和奶粉,飲料等樣品的提取,對(duì)提高食品的質(zhì)量和安全性起到十分重要的作用。*符合GB 5009.285-2022食品中維生素B12的測(cè)定等國(guó)家食品安全標(biāo)準(zhǔn)。



原理

Welchrom® 維生素B12免疫親和柱測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),維生素B12單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠上,樣品中的維生素B12經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢的通過維生素B12免疫親和層析柱,在免疫親和柱內(nèi),維生素B12與抗體結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結(jié)合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫維生素B12,然后注入到分析儀器中用于檢測(cè)。

凈化步驟



01

取10g試樣于50mL離心管中,加入30mL乙酸鈉緩沖液,用氫氧化鈉溶液調(diào)pH至4.0,加入0.2g胃蛋白酶、0.05g淀粉酶和2mL氰hua鉀溶液,充分混合。將樣品溶液放入水浴恒溫振蕩器,在37℃,振蕩酶解30min。




02

酶解后轉(zhuǎn)入100℃水浴中,保持30min,取出冷卻至室溫。將樣品溶液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,用水定容至刻度,搖勻。


03

移取上述溶液40mL至50mL離心管中,在10000r/min下離心10min,取上清液用玻璃纖維濾紙過濾后備用。


04

將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器。


05

將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/S的流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體。


06

以10.0mL的PBS溶液和去離子水依次淋洗柱子1次,流速約為1-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體。


07

準(zhǔn)確加入1.0mL色譜級(jí)甲醇洗脫,流速為1滴/S,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測(cè)用。



色譜條件


色譜柱:月旭UItimate® XB-C18(4.6×150mm,3μm)。

流動(dòng)相:

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柱溫:40℃;

紫外檢測(cè)器:361nm;

流速:0.8mL/min;

進(jìn)樣量:100μL。


流動(dòng)相配置


A(0.04%三氟yi酸):移取200μL三氟yi酸,加入500mL水,混勻。

B(乙腈):色譜級(jí)乙腈,抽濾。


譜圖


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產(chǎn)品信息

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